准确分析甘草种子质量的方法

来源：　类别：技术文章　更新时间：2013-01-22　阅读次

　　甘草一是属于豆花蝶形花亚科的灌木状多年生植物，在中国主要集中在二北地区（东北、华北、西北），是中国的传统中药，有“国老”、“十方九草”之誉。
　　其主要成分是甘草酸，具有益气补中、清热解毒、祛痰止咳、缓急止痛、缓和药性等功效。甘草茎叶中含有丰富的蛋白质和脂肪，是一种优良的牧草，甘草对维护生态平衡也起着重要的作用，在食品、饮料、卷烟、化妆品等工业中也有着广泛的用途。基于甘草-广泛的用途，世界各国对甘草的需求量不断上升，山于对甘草无计划的采挖，使甘草资源遭到少，认重破坏。
　　近年来，甘草的人工栽培面积不断扩大。但口前市场上流通的种子绝大部分仍然处于原始生产和自然采集阶段，加上长期重复使用，种子质量逐渐退化，影响其药材的质量。优质种子是生产优质药材的前提条件，笔者对口前市场上出售的甘草种子进行质量分析，以阐明中国口前市场上的甘草种子质量状况，以期为中药材种子贸易的规范化、中药材生产及其种子质量标准的制定提供科学依据。
　　1 材料与方法
　　1.1 材料
　　甘草种子，其编号、产地及购买地见表1,实验于2004年5-8月进行。

　　表1 实验材制
　　1.2 仪器
　　光照培养箱、种子风选净度仪、放大镜、真空吸种置床仪、电子天平、发芽盒、滤纸、镊子、尺子
　　1.3 方法
　　1.3.1 净度分析
　　扦取30g样品，在净度分析桌上将样品分为净种子、其它植物种子及杂质两种成分，分离后分别称重，计算净度。
　　1.3.2 测千粒重
　　扦取1000粒种子，用电子天平测定其重量，重复3次。
　　1.3.3 测量种子大小
　　取50粒种子，排成一排，测定50粒种子的总直径。计算单粒种子的直径。重复3次。
　　1.3.4 发芽试验
　�。�1）直接发芽：将发芽盒用70%酒精消毒后，盒内铺二层滤纸，加蒸馏水湿润，将100粒种子整齐摆在发芽盒内，25 ℃培养箱内光照培养。每天注意往发芽盒内加水，保证发芽盒的湿润，到试验第l0d统计种子发芽数、硬实数。设3次重复。
　　（2）浓硫酸处理发芽：不同来源种子各取300粒，加入98%浓度的浓硫酸1ml，混拌均匀，浸泡70min，再用清水冲净。然后按上述方法进行发芽试验。到试验第l0d统计种子发芽数、硬实数及霉变数。
　　2 结果与分析
　　2.1 千粒重
　　从图1可看出，5份新疆甘草种子的千粒重均在1Og以下，最低为9.225g，最高也仅有9.617g，宁夏和内蒙古的甘草种子的千粒重都在11g以上，其中内蒙古杭锦旗甘草种子的千粒重达到12.705g，宁夏同心甘草种子的千粒重达13.967g。方差分析结果表明，甘草种子的千粒重在不同产地之间存在着极显着差异，新疆甘草种子之间千粒重则不存在显着差异。

　　图1 不同来源甘草种子的千粒重（9）

　　图2 不同来源甘草种子的直径（cm）
　　2.2 种子直径
　　从图2可看出，5份新疆甘草种子的直径较小，均小于0.280cm，宁夏和内蒙古甘草的种子直径均在0.287cm以上，其中内蒙古杭锦旗甘草种子直径达到0.307cm，方差分析结果表明，甘草种子直径在不同产地之间存在极显着差异，同是新疆产地和同是宁夏产地的甘草种子之间则不存在显着差异。

　　表2 不同产地甘草种子质量分析结果
　　2.3净度分析
　　从表1可看出，不同产地不同来源的甘草种子之间净度差异较大，最高的可达93.4%，最低的只有58.0%。净度超过90%的种子只有1份，有5份种子的净度在80%~90%之间，有4份种子的净度未超过70%。种子净度在不同甘草种子样品之间均存在显着差异。种子内的杂质主要是破碎的种子及沙土。

　　图3 浓硫酸处理前后甘草种子的发芽率（%）
　　2.4 发芽率
　　不同来源的甘草种子的发芽率之间存在着极显着的差异，有4份甘草种子的发芽率在70%左右，1份甘草种子的发芽率为54%，其它甘学-种子的发芽率都在40%以下，最低的发芽率只有12%a将种子用浓硫酸处理后，大部分甘草种子的发芽率均显着增加（见图3），处理后的发芽率都达到65%以上（除样品7）。但是原发芽率在70%左右的4份种子的发芽率增加幅度较小，在15%以下，原发芽率在40%以下的5份甘草种子发芽率增加幅度较大，在33%~68%之间。只有样品7的发芽率没有变化。
　　2.5 硬实
　　不同来源甘草种子的硬实率相差非常大，变化范围在20%~80%之间（除样品7）。将种子用浓硫酸处理后，硬实率显着下降（见图4），有5份样品的硬实率为0，其它样品的硬实率也在3%以下。
　　2.6 霉变
　　从表2可知，甘草种子未处理直接发芽，其霉变率在15%以下，但将种子用浓硫酸处理后，各个样品在发芽试验过程中，霉变大量增加（图5），最低为9.3，最高达41.0%。

　　图4 浓硫酸处理前后甘草种子的硬实率（%）

　　图5 浓硫酸处理前后甘草种子的霉变率（%）
　　3 结论与讨论
　　3.1 千粒重与种子直径
　　内蒙古和宁夏的甘草种子的千粒重及种子直径要显着高于新疆甘草种子，GuHui-yan等人曾研究过中国14个产地的甘草的甘草酸的含量，认为内蒙古的甘草质量要好于新疆甘草。但林寿全（1993）的研究则认为新疆甘草的甘草酸含量要高于其它产地。笔者认为甘草种子的千粒重和大小与甘草的质量可能存在一定的关系，有必要研究种子大小与成品甘草质量之间的关系，为制定甘草种子分级标准提供可靠的依据。中国1986年颁布的人参种子分级标准就是以种子大小作为主要指标划分种子等级同。千粒重与种子直径在新疆产地的甘草种子之间差异不显着，说明千粒重、种子直径与产地之间存在一定的关系，究竟是品种还是气候、土壤等因素造成这种现象，还有待于进一步研究。
　　3.2 净度
　　不同来源的甘草种子净度差别非常大，50%的种子样品净度达到80%以上。笔者认为通过种子清选精选，可以进一步提高种子的净度。
　　3.3 发芽率
　　不同来源甘草种子的发芽率变化范围较大，在12%~70%之间，用浓硫酸处理后，发芽率显着增加，发芽率在65%~83%之间。
　　3.4 硬实
　　不同来源的甘草种子存在一定的硬实率，在20%~80%之间（样品7除外）。甘草种子存在较高的硬实率，发芽以前必须经过破硬实处理。在破硬实处理方面，已经有大量的研究报告，所用的方法也多种多样，如碾种法、硫酸浸种法、氢氧化钠溶液浸种法、热水浸种法、砂磨法、高温浸种法等。
　　在实验中，采用了浓硫酸处理的方法，用浓硫酸处理以后，有5份样品的硬实率为0，其它5份样品的硬实率也在3%以下。说明浓硫酸可以有效地破除甘学一种子硬实。
　　在样品处理前，通过放大镜可以观察到样品2,3,4,5,7种子表面较粗糙，无光泽，不象其它种子表面那样光滑，山此推断这几份种子可能进行过机械破硬实处理，但是发芽试验的结果表明，除了样品7,其它种子仍然存在一定的硬实率。
　　3.5 霉变率未用浓硫酸处理时，甘草种子的霉变率均在15%以下，用浓硫酸处理后，甘草种子的霉变率显着增加，从9%~41%。这可能因为用浓硫酸处理后，用清水冲洗过程中，种子受到一定的污染，而目_硬实破除以后，甘草种子内部的甘草甜素等物质更容易渗透出来，为霉菌的繁殖提供营养，造成霉菌的迅速增长。种子在未处理前，其发芽率与硬实率的总和要高于处理后的发芽率，其中原因就是霉变率太高，导致发芽率下降。
　　总的来说，中国市售甘学一种子质量良荞不齐，净度、发芽率、硬实等差异均较大，而目_有的种子经过破硬实处理，有的未经处理。所有出售的甘草种子均无包装及质量、栽培说明，建立加强甘草种子质量分级标准及甘草种子检验标准的制定，以规范甘草种子市场。