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UPLC vs HPLC：访全球第一位UPLC用户
2004年，沃特世（Waters）公司率先推出超高效液相色谱——ACQUITY UPLCTM系统，随后，其他知名液相色谱生产厂家也纷纷推出各自的快速液相色谱产品。沃特世公司如何保持自己的竞争优势？UPLC的销售情况如何？用户的使用感受如何？快速液相色谱能否完全取代常规液相色谱的应用？
Instrument：据介绍，梁老师您是沃特世公司全球第一位UPLC用户，通过这款产品您主要进行了哪些科研工作？与HPLC相比，您认为UPLC有什么样的技术优势和特点？
梁鑫淼研究员：我们实验室主要用UPLC进行中药组分的分离分析。我们感觉它与常规的液相色谱（HPLC）相比，表现出更快速、更高效的特点，它的分析灵敏度也很好，能节省很多溶剂，在中药、食品等复杂样品的分离分析上具有明显的优势，并且，某些情况下能将HPLC不能分开的两个峰分开。此外，UPLC与Q-TOF（四极杆飞行时间串联质谱仪）联用之后，能提高质谱分析的灵敏度，这也是UPLC具有的优势的体现。
UPLC与HPLC之间没有原理上的本质区别，但UPLC有两个技术特点：1、对于液相色谱而言，为了增加柱效，可以减小填料颗粒度，但是系统压力会随之上升，UPLC技术解决了整个系统在运行压力上的问题，仪器的连接系统、阀、配用的柱子等都能耐得起高压；2、在流速较高的情况下，柱效损失小，比如：如果使用
Instrument：这几年来，就中国市场而言，UPLC和HPLC产品的销售情况如何？
伍小薇女士：在中国市场，HPLC的销量在逐渐增长，但UPLC的销量增长的更快。
李彦憙博士：还要看行业，如在食品安全方面，UPLC与HPLC的销量在快速同步地增长，而在其它行业，情况则有所不同。
Instrument：沃特世公司自2004年推出UPLC以来，在其应用上做了哪些拓展？
李彦憙博士：我们一直在完善UPLC技术，根据用户的需求也发展了一些特别的应用，如我们开发了一套不需要柱后衍生就能检测食品中黄曲霉素的UPLC系统；对于环境中PFCs（全氟化合物）的检测，我们推出了一套解决方案；我们还推出了基于UPLC的生物体液氨基酸分析系统，该系统被预先配置所要求的仪器、方法、化学品、流动相、标准样品和消耗品；我们针对生命科学领域，推出了纳升级UPLC，针对蛋白质分析，推出了TRIZAICTM UPLC。另外，预计年底将推出PATROLTM UPLC，它可以进行在线质量控制，适用于制药企业等。
Instrument：快速液相色谱技术是否将完全取代常规液相色谱技术（HPLC）？
梁鑫淼研究员：谈不上完全取代，只能说UPLC的应用会越来越多。UPLC比HPLC贵，但使用消耗不一定比HPLC多。我们现在也用HPLC，它的柱子相对较粗，适合做微量制备，还适合分析微量化合物。总之，样品量小时，可以选择使用UPLC，样品量较大时，二者都可用，选择UPLC还是HPLC，要看用户自身的需求。
李彦憙博士：UPLC应该不会完全取代HPLC。HPLC比较适合于某些应用，或者有些用户不需要UPLC进行这么高通量的分析，而且我也认为，在纯化方面，HPLC的上样量大一点，因此还是有它的优势。
Instrument：能实现UPLC与HPLC之间的方法转移吗？
李彦憙博士：进行方法转移时，最重要的是首先要挑对柱子。沃特世公司有一个软件叫Waters® Selectivity Chart，利用它可以在同一条件下、用同一个化合物检测对比很多不同品牌的柱子，通过该软件生成的表格，用户可以挑选类似的柱子，然后用工作站自带的计算器计算出合适的流速、梯度，从而实现UPLC与HPLC之间的方法转移。
我再次强调，进行方法转移时，首先要挑对柱子，分析条件是可以计算的。其次要注意系统的死体积，HPLC和UPLC的死体积不一样。
Instrument：柱填料的颗粒直径是否越小越好？
李彦憙博士：关于颗粒直径越小柱效越高的说法在Van Deemter Carve理论中就有提出。但颗粒变小，系统压力会随之变大，而且可能是在颗粒直径下降几微米的情况下，系统压力却上升了很多倍。因此，颗粒直径的大小程度还要看系统和应用的要求。
与全球第一台UPLC合影
（从左至右：李彦憙博士、梁鑫淼研究员、伍小薇女士）
Instrument：本网论坛上有一些用户反映，他们在使用UPLC时，会碰见柱子堵塞的情况，请问使用UPLC时是否对样品前处理的要求很严格？
梁鑫淼研究员：我认为UPLC的使用不会对样品前处理有特殊的要求，这与使用HPLC时的要求是一样的。柱子堵塞可能跟操作不当有关系，使用液相色谱时，要保证溶剂系统是干净的，流动相在使用前要用0.22μm或0.45μm的膜过滤一下，最好是每天换水，避免滋生细菌。如果流动相含盐，需要在样品分析结束后用含大量水的流动相冲洗一下柱子。要注重细节，要注意不正常状态下会发生什么样的问题，学会解决这些问题，仪器维护是重要和必需的。
Instrument：近几年来，很多仪器公司相继推出了自己的快速液相色谱产品，而且价位相对较低，沃特世公司怎么应对这些竞争？
李彦憙博士：对沃特世公司来说，UPLC是我们五年前推出来的，很高兴有这么多同行认同我们的理念和发展方向。我们认为UPLC是一个整体，它涉及到一套完整的解决方案，包含色谱柱、软件、应用、技术支持、质谱检测器等等，这是我们的优势。迄今为止，涉及到UPLC的论文已经超过450篇。
在液相色谱产品线上，实际上我们除了提供UPLC系列产品，还提供Alliance系列甚至更低端的Breeze系列液相色谱仪。这几款产品分别针对不同层次的用户，具有不同的价位档次。
Instrument：沃特世公司会对用户进行哪些培训？产品保修期满后，贵公司的售后服务方式有何变化？
我们为用户提供为期一年的仪器保修服务，保修期满后，用户可选择购买相应的维修合同或付费服务，而服务价格比我们在美国及欧洲的收费都低。
张立猛先生：我们定期开设“液相培训班”，用户可以在网上选择培训课程，培训收费很合理，甚至比同行的收费还低，我们在网上有公开报价。
附录：UPLC技术发展历程
沃特世（Waters）公司不断拓展UPLC分析平台，发展了紫外检测器、二极管阵列检测器、荧光检测器、蒸发光散射检测器到涵盖包括单四极杆、串联四极杆、飞行时间质谱等LC-MS联用技术来满足用户不同的应用需求，包括ADME筛选、食品安全、生物分析、临床试验分析、代谢物鉴定、代谢组学、方法开发和开放性实验室应用等。
色谱柱——色谱分离的核心。2004年，沃特世公司推出ACQUITY UPLC系统；至2006年，沃特世公司推出了1.7μm的亚乙基桥杂化(BEH)颗粒和1.8μm高强度硅胶(HSS)颗粒，以及8种不同键合相的常规UPLC色谱柱以满足用户常规分析以及方法开发的需求；同时还提供专用于氨基酸、多肽、蛋白质以及核酸片段分析的全面解决方案；2006年下半年，沃特世公司经过两年多的研究开发，推出了ACQUITY UPLC的专用�；ぶ鵙anGuard，帮助有效延长色谱柱寿命；2009年，第二代
如今的UPLC早已不是一款仪器的代名词，沃特世公司提供一整套从产品、技术、耗材到服务上的解决方案，包括Empower软件以及质谱应用软件MassLynx在内的多种软件解决方案，解决了越来越多的用户在一般甚至是特定应用需求下的众多问题。
ACQUITY UPLC系统分析过程中，在保证了分析结果质量的同时，实现了从每个样品中节省大量的时间与金钱。运行时间减少高达90%，减少溶剂使用高达95%，节约实验室的能源及空间，被数千家大型实验室采用。该系统的性能比传统的或优化的HPLC更出色，使色谱系统的工作效率更高，线性速度、流速、耐压范围要宽得多。
作为一款高度稳定、可靠、重现性好的色谱系统，超高效液相色谱系统已经成功地在全世界各大实验室的各种苛刻分析领域中广泛应用。系统整体设计的独到之处在于沃特世公司已获专利的亚二微米杂化颗粒技术，与当今传统的5μm颗粒填料技术的HPLC系统相比，各方面性能得到了显著的提高。
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